半纤维素酶活性测定条件的初步研究

 3,5 –二硝基水杨酸法广泛用于测定还原糖的含量，后者可定量表征半纤维素酶的水解活性。然而由于微生物的多样性造成各种半纤维素酶具有不同的酶学性质。因此，在一个统一的条件下分析所有半纤维素酶并不实际。在这份研究中，逐个考察了影响DNS法测定半纤维素酶（Sigma）活性的关键因素。最佳测定条件下如下：吸收波长490nm，反应pH4.5(醋酸-醋酸钠缓冲，50 mmol/L)，半纤维素酶浓度0.2 g/L，木聚糖浓度5 g/L，反应时间16 分钟，显色时间5分钟。与原定DNS法相比，优化后分析条件下得出的半纤维素酶比活力显示良好的重复性和满意的精确度。这种方法不仅可以探索半纤维素酶的活性，也可以用于研究其它通过显色反应测定酶活的实验中。

关键词：半纤维素酶；3,5 –二硝基水杨酸；测定条件；还原糖

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