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6B5 SCFV的原核表达纯化及鉴定


全文字数:20000字左右  原创时间:<=2022年

【内容摘要】

6B5 SCFV的原核表达纯化及鉴定目的:原核表达、纯化并鉴定6B5 SCFV。方法:对含有6B5 SCFV重组质粒的E.coli,IPTG诱导表达,对表达产物进行WESTERN分析,用Ni-NTA金属螯合层析柱对表达产物进行分离纯化得到SCFV蛋白,纯化蛋白通过布拉德福德法测定浓度,并用蛋白跑胶鉴定。结果:重组6B5 SCFV在大肠杆菌中经诱导得到有效表达,用Goat anti mouse荧光第二次加的抗体对表达产物进行Western遗迹分析,结果显示在相对分子量35kDa处均有特异结合条带,与预期大小吻合,多为可溶蛋白,但也有部分饱含体;纯化后蛋白产量约为 。结论:在大肠杆菌中成功重组表达了6B5 SCFV。
关键词: SCFV;原核表达;纯化;鉴定

 

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