德氏有孢圆酵母高产植酸酶基因的克隆本实验是从紫外线诱变后的德氏有孢圆酵母菌中筛选出植酸酶活性较高的几种菌株，使用本实验室自行配制的试剂提取植酸酶DNA，并以其为模板，根据植酸酶基因序列（Gene Bank No. XM_003681994）设计特异性引物PhyFor1和PhyRev1，采用PCR技术克隆出高产植酸酶基因。将克隆出的植酸酶基因片段连接到pMD-18T载体上，并转化到大肠杆菌E. coli DH5α中。对转化成功的大肠杆菌进行序列测定，测序结果显示植酸酶基因全长1329bp，编码442个氨基酸。菌株222由原A521碱基突变成G521碱基，导致氨基酸的改变结果是由Asp174变为Gly174。菌株244由原A1120碱基突变成G1120碱基，导致氨基酸的改变结果是由Asn374变为Asp374。菌株167由原A287碱基突变成G287碱基，A1072碱基突变成G1072碱基，导致氨基酸的改变结果是由Asp96变为Gly96，Thr358变为Ala358。
关键词：德氏有孢圆酵母菌；植酸酶基因；克隆； 突变；
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