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一株产淀粉酶菌株的分离、鉴定及酶活性初步分析


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【内容概述】

一株产淀粉酶菌株的分离、鉴定及酶活性初步分析

【目的】本实验是从湿地微生物中筛选产淀粉酶菌株,普通淀粉酶的最佳pH值一般为5-6,而本实验希望能够得到了一种能够有较广pH适应性的淀粉酶,以增加淀粉酶的工业价值。【方法】从三门峡天鹅湖地段进行采样,将所采集的泥样用牛肉膏蛋白胨培养基进行富集培养,富集后,经过梯度稀释,然后涂布平板,将平板培养后挑取出形态较好的单菌落,用含淀粉的培养基筛选出可以产生淀粉酶的菌株并进行斜面或甘油保藏。【结果】对该菌进行16S rDNA 扩增并测序,确定该菌株为Bacillus属(芽孢杆菌),并对该菌株命名为ABH17。对该菌株进行生理生化分析,Cu2+对该菌株生长有促进作用,在pH为6时生长较好,最适生长温度为40℃,在含氯的有机溶剂中生长较好(醇和Tris的存在对其有抑制作用)。对该菌株所产淀粉酶进行生理生化研究时,可发现该酶在40℃时的水解圈最大(活性最高),在pH为7时活性最高,对该淀粉酶采用不同的离子和有机溶剂处理时,可发现Mg2+和氯的存在对其活性有促进作用。【结论】通过对该菌的研究可发现该菌所产的淀粉酶有较广的pH适应,本实验对促进我国湿地微生物资源的开发具有重要意义,为今后进一步将ABH17菌株应用于工业方面的研究奠定了基础。

关键词:16S rDNA;筛选;淀粉酶;Bacillus

 

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