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莲子心生物碱体外抗神经炎症作用


类型:案例|12000字, 类别:原创|SPSS系数380, MBA附件:开题报告|文献综述

【摘要】

莲子心生物碱体外抗神经炎症作用


神经退行性疾病(Neurodegenerative Disease,NDD)以神经系统中的细胞功能异常和死亡为特征,这会造成运动功能障碍和进展性痴呆。小胶质细胞(MG)是中枢神经系统中一种巨噬细胞样的细胞,其数量占人脑总细胞数的5-10%。正常生理状态下,适度激活的小胶质细胞有神经保护作用,而过度激活会使其释放大量的神经毒性因子,如NO、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)等,造成神经元损伤,最终导致阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease, AD)、帕金森病(Parkinson's disease, PD)等神经退行性疾病的发生。抑制小胶质细胞的过度活化已经成为防治神经退行性疾病的重要策略之一。
本研究考察了三种莲子心生物碱(莲心碱、甲基莲心碱、异莲心碱)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠小胶质细胞系BV2过度活化的抑制作用。首先,培养小鼠小胶质细胞系BV2,取生长状态良好的小胶质细胞,分别采用划痕实验法考察三种莲子心生物碱(10 μM)与LPS(1 μg/mL)联合作用对小胶质细胞迁移能力的影响。实验结果显示,三种莲子心生物碱可显著抑制LPS过度活化的巨噬细胞迁移能力的增强。其次,应用酶联免疫吸附分析实验(ELISA)考察了三种莲子心生物碱对LPS(1 μg/mL)激活的小胶质细胞释放炎症因子(IL-8)的影响。实验结果显示,分别加入三种莲子心生物碱(10 μM )与LPS共同作用于巨噬细胞4 h后,LPS过度激活引起的巨噬细胞IL-8释放量增加被显著降低。
为了进一步考察三种莲子心生物碱(10 μmol/L)对LPS活化的小胶质细胞内胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,本研究采用Fura-2/AM标记钙离子,荧光分光光度仪检测的方法进一步证明了三种莲子心生物碱可明显抑制LPS诱导的小胶质细胞内[Ca2+]i水平的增加。
本研究还考察了3种莲子生物碱碱对DPPH自由基、羟自由基、过氧亚硝酸自由基和超氧阴离子自由基的直接清除作用。结果表明,3种生物碱对DPPH自由基、羟自由基、过氧亚硝酸自由基有显著清除作用,而在0-30 μmol/L浓度范围内对超氧阴离子自由基无显著清除作用。
综上所述,三种莲子心生物碱(莲心碱、甲基莲心碱、异莲心碱)对脂多糖(LPS)诱导的BV2小鼠小胶质细胞过度迁移、IL-8过度释放及胞浆[Ca2+]i的异常增高可产生明显的抑制作用,且具有较好的自由基清除及抗氧化能力。说明其具有体外抗神经炎症作用,可能对由于小胶质细胞过度活化而引起的神经炎症疾病具有潜在的预防和治疗作用,极具进一步研究价值。

关键词:莲子心生物碱;小胶质细胞;神经炎症

 

 

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